## 产品中英文名称

**中文名称：** 马来酰亚胺活化链霉亲和素 / 马来酰亚胺标记链霉亲和素
**英文名称：** Maleimide activated-Streptavidin
**其他写法：** Maleimide-Activated Streptavidin / Maleimide Functionalized Streptavidin

## 产品介绍

Maleimide activated-Streptavidin 是一种在链霉亲和素大分子表面预先引入马来酰亚胺反应基团的功能化偶联试剂。与普通 Streptavidin 相比，该产品不仅保留链霉亲和素与 Biotin 之间高度稳定的亲和结合特征，同时在蛋白外表面增加了可与游离巯基发生反应的 Maleimide 位点，因此能够将“Biotin 亲和组装”和“SH 共价连接”两种不同的分子固定方式集中到同一大分子平台中。

链霉亲和素本身属于多亚基蛋白结构，表面存在可进行化学修饰的氨基及其他官能位点。在制备 Maleimide activated-Streptavidin 时，通常会利用带有 NHS Ester 或其他胺反应端的双功能连接体，先与链霉亲和素表面的伯胺形成稳定连接，再将 Maleimide 保留在分子外侧。由此形成的产品可以理解为 Streptavidin-Linker-Maleimide 结构。

Maleimide 活性基团具有明确的巯基反应特点。在适宜的中性或弱酸至近中性环境下，可与含 SH 的小分子、巯基 PEG、硫醇化高分子或巯基功能化表面发生加成，并形成稳定的硫醚连接。因此，使用 Maleimide activated-Streptavidin 时，可以将链霉亲和素直接固定到已经带有巯基的颗粒、膜片、微球或聚合物链上，而无需再次使用传统活化酯进行随机连接。

这种产品的一个重要特点，是共价固定方向与亲和结合方向彼此分离。Maleimide 负责把 Streptavidin 固定到主体材料上，而链霉亲和素原有的 Biotin 结合位点可以继续用于后续组装。这样可以先建立较稳定的共价底层，再利用 Biotin 化分子完成第二层或多层结构的构建。

例如，可以先在聚合物微球表面引入 SH，再加入 Maleimide activated-Streptavidin。Maleimide 与表面巯基反应后，Streptavidin 被固定在微球外层。随后再加入 Biotin-PEG-FITC、Biotin-Cy5、Biotin-N3 或其他生物素化试剂，即可通过亲和作用将第二功能单元排列到颗粒表面。整个过程无需重新改变微球主体结构，具有较好的模块化特点。

如果使用 SH-PEG 修饰的平面材料，同样可以通过 Maleimide 端完成链霉亲和素固定。PEG 间隔臂可使 Streptavidin 与固体表面保持一定距离，降低直接贴附在界面上造成的空间限制。之后利用 Biotin 端的不同衍生物，就可以进一步调节表面的荧光、亲水性或其他化学特征。

Maleimide 的修饰程度是影响产品表现的重要参数。如果单位 Streptavidin 上 Maleimide 数量过低，后续与 SH 材料的固定效率可能不足；如果修饰过高，则大量连接体可能改变蛋白表面电荷、空间结构或亲和位点周围环境。因此，该类产品通常需要在反应位点数量和大分子结构保持之间取得平衡。

与普通 Maleimide-PEG-NHS 等小分子试剂相比，Maleimide activated-Streptavidin 已经完成了第一阶段活化，使用时无需再自行将 Maleimide 安装到 Streptavidin 上。这样可以减少重复偶联和纯化步骤，并降低未反应小分子残留造成的干扰。对于需要直接进行 SH 固定的实验，更适合作为即用型大分子连接平台。

在水相操作时，应注意 Maleimide 的稳定时间。长时间处于偏碱环境下可能促进 Maleimide 环水解，从而降低其与 SH 的反应能力，因此通常建议在配置后较快完成偶联。另外，目标材料上的巯基应保持还原状态，若大量转变成二硫键，则实际可用于反应的 SH 数量会下降。

反应完成后，可通过凝胶过滤、超滤或其他大分子分离方式除去未结合的小分子巯基组分。若 Maleimide activated-Streptavidin 被固定到颗粒上，则可通过离心、洗涤或过滤去除游离蛋白。充分纯化有助于后续进行 Biotin 组装时获得更清晰的背景。

由于 Streptavidin 属于蛋白质大分子，操作过程中不宜采用过于剧烈的有机溶剂、高温或极端 pH。应优先选择温和缓冲体系，并避免长时间剧烈振荡。若产品以冻干粉形式提供，复溶时可缓慢加入合适缓冲液，轻柔混匀，减少泡沫产生。

该产品也适用于荧光材料构建。例如，先通过 Maleimide 将其固定到 SH 功能化表面，再加入 Biotin-FITC、Biotin-Cy3、Biotin-Cy5 或其他荧光生物素衍生物，可快速获得具有不同颜色的功能层。相比直接对 Streptavidin 进行高密度染料标记，这种后装配方式在染料种类更换上更加灵活。

总体而言，Maleimide activated-Streptavidin 是一种兼具巯基共价偶联和 Biotin 亲和组装能力的大分子连接平台。Maleimide 负责完成与 SH 材料的定向固定，Streptavidin 则保留其多位点亲和结合能力，两种连接机制相互独立又可以连续使用。该结构适合用于微球、颗粒、薄膜、凝胶和聚合物表面的分级修饰，也可进一步与荧光、生物素化 PEG 及其他模块化试剂组合。

## 十个相关试剂产品

1. Streptavidin-FITC
2. Streptavidin-Cy3
3. Streptavidin-Cy5
4. Streptavidin-TAMRA
5. Streptavidin-ICG
6. NHS-activated Streptavidin
7. Biotin-PEG-Maleimide
8. Biotin-PEG-SH
9. Maleimide-PEG-NHS Ester

10. Maleimide-PEG-Biotin